SDS-PAGE凝胶制备试剂盒
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    SDS-PAGE凝胶制备试剂盒

    货号:ZKP092

    规格:40-60块

    SDS-PAGE凝胶制备试剂盒
    • 详情说明
    • SDS-PAGE凝胶制备试剂盒

      英文名称:SDS-PAGE kit
      规格:40-60块

      产品简介:
      SDS-PAGE凝胶制备试剂盒规格:可制40-60块凝胶
      本公司生产的SDS-PAGE凝胶配制试剂盒(SDS-PAGE Gel Parparation Kit)提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制PAGE胶了。SDS-PAGE凝胶配制试剂盒不仅可用于配制SDS-PAGE凝胶,也可用于配制非变性(native)PAGE凝胶。
      本试剂盒可配制不同常规、不同聚合度的PAGE胶(即聚丙烯酰胺凝胶) 约40-60块。

      包装清单

      30%丙烯酰胺混合液 100ml
      1.5mol/L Tris(pH8.8)
      100ml
      1.0mol/L Tris(pH6.8)
      30ml
      10%过硫酸铵
      5ml
      10% SDS
      5ml
      TEMED
      0.5ml
      说明书
      一份

      保存条件
      保存: 10% SDS和TEMED (避光) 室温保存。30%丙烯酰胺混合液、1.5mol/L Tris(pH8.8)、1.0mol/L Tris(pH6.8)4°C保存、过硫酸铵配制成10%溶液后,分装成小管-20°C保存,通常半年内有效。

      使用说明:
      1. 10%过硫酸铵为5ml,应分装置-20°C保存,通常半年内有效。
      2. 根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶)。
      SDS-PAGE分离胶的浓度与最佳分离范围

      SDS-PAGE分离胶浓度
      最佳分离范围
      6%胶
      57-212kD
      8%胶
      36-94kD
      10%胶
      20-80kD
      12%胶
      12-60kD
      15%胶
      10-43kD

      配制6%的PAGE分离胶
      成分
      所需各成分的体积(毫升)
      凝胶体积
      5 10 15
      20
      25
      30
      蒸馏水
      2.6
      5.3
      7.9
      10.6
      13.2
      15.9
      30%丙烯酰胺混合液
      1.0
      2.0
      3.0
      4.0
      5
      6.0
      1.5mol/L Tris(pH8.8)
      1.3
      2.5
      3.8
      5.0
      6.3
      7.5
      10%SDS
      0.05
      0.1
      0.15
      0.2
      0.25
      0.3
      10%过硫酸铵
      0.05
      0.1
      0.15
      0.2
      0.25
      0.3
      TEMED
      0.004
      0.008
      0.012
      0.016
      0.02
      0.024

      配制8%的PAGE分离胶
      成分
      所需各成分的体积(毫升)
      凝胶体积
      5
      10
      15
      20
      25
      30
      蒸馏水
      2.3
      4.6
      6.9 9.3
      11.5
      13.9
      30%丙烯酰胺混合液
      1.3
      2.7
      4.0
      5.3
      6.7
      8.0
      1.5mol/L Tris(pH8.8)
      1.3
      2.5
      3.8
      5.0
      6.3
      7.5
      10%SDS
      0.05
      0.1
      0.15
      0.2
      0.25
      0.3
      10%过硫酸铵
      0.05
      0.1
      0.15
      0.2
      0.25
      0.3
      TEMED
      0.003
      0.006
      0.009
      0.012
      0.015
      0.018

      配制10%的PAGE分离胶
      成分
      所需各成分的体积(毫升)
      凝胶体积
      5
      10
      15 20
      25
      30
      蒸馏水
      1.9
      4.0
      5.9 7.9
      9.9
      11.9
      30%丙烯酰胺混合液
      1.7
      3.3
      5.0
      6.7
      8.3
      10.0
      1.5mol/L Tris(pH8.8)
      1.3
      2.5
      3.8
      5.0
      6.3
      7.5
      10%SDS
      0.05
      0.1
      0.15
      0.2
      0.25
      0.3
      10%过硫酸铵
      0.05
      0.1
      0.15
      0.2
      0.25
      0.3
      TEMED
      0.002
      0.004
      0.006
      0.008
      0.01
      0.012

      配制12%的PAGE分离胶
      成分
      所需各成分的体积(毫升)
      凝胶体积
      5
      10
      15
      20 25
      30
      蒸馏水
      1.6 3.3
      4.9
      6.6
      8.2
      9.9
      30%丙烯酰胺混合液
      2.0
      4.0
      6.0
      8.0
      10.0
      12.0
      1.5mol/L Tris(pH8.8)
      1.3
      2.5
      3.8
      5.0
      6.3
      7.5
      10%SDS
      0.05
      0.1
      0.15
      0.2
      0.25
      0.3
      10%过硫酸铵
      0.05
      0.1
      0.15
      0.2
      0.25
      0.3
      TEMED
      0.002
      0.004
      0.006
      0.008
      0.01
      0.012

      配制15%的PAGE分离胶
      成分
      所需各成分的体积(毫升)
      凝胶体积
      5
      10
      15
      20
      25
      30
      蒸馏水
      1.1
      2.3 3.4 4.6
      5.7
      6.9
      30%丙烯酰胺混合液
      2.5
      5.0
      7.5
      10.0
      12.5
      15.0
      1.5mol/L Tris(pH8.8)
      1.3
      2.5
      3.8
      5.0
      6.3
      7.5
      10%SDS
      0.05
      0.1
      0.15
      0.2
      0.25
      0.3
      10%过硫酸铵
      0.05
      0.1
      0.15
      0.2
      0.25
      0.3
      TEMED
      0.002
      0.004
      0.006
      0.008
      0.001
      0.012

      3. 按照如下表格配制SDS-PAGE的浓缩胶(也称上层胶、积层胶或堆积胶)

      配制不同体积的浓缩胶
      成分
      所需各成分的体积(毫升)
      凝胶体积
      2
      3
      4
      5
      6
      8
      蒸馏水
      1.4
      2.1
      2.7
      3.4
      4.1
      5.5
      30%丙烯酰胺混合液
      0.33
      0.5
      0.67
      0.83
      1.0
      1.3
      1.0mol/L Tris(pH6.8)
      0.25
      0.38
      0.5
      0.63
      0.75
      1.0
      10%SDS
      0.02
      0.03
      0.04
      0.05
      0.06
      0.08
      10%过硫酸铵
      0.02
      0.03
      0.04
      0.05
      0.06
      0.08
      TEMED
      0.002
      0.003
      0.004
      0.005
      0.006
      0.008

      注意事项 
      10%过硫酸铵的水溶液不稳定,每次取用后应立即放回冰箱,尽量减少室温存放时间,以防失效。如发现凝胶聚合不好,应考虑丢弃使用过的10%过硫酸铵,更换新配制的10%过硫酸铵。
      另外PAGE凝聚的速度和温度及催化剂的用量关系密切,在其它条件不变的情况下,可通过改变TEMED的用量,控制PAGE凝胶的聚合速度,凝胶聚合过快不利于操作。操作中,特别是液体的混匀应尽量避免气泡的产生。
      未聚合的丙烯酰胺有毒,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


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